Transforma??o do algod?o com constru??o baseada em siRNA direcionada ao CLCuD

O algodão é uma cultura importante. Nos últimos anos, a doença do enrolamento das folhas do algodão (CLCuD) surgiu como uma endemia. Ela tem causado um grande obstáculo na produção de altos rendimentos de algodão. Esta doença é causada por um grupo de begomovírus, chamado doença do enrolamento das folhas do algodão (CLCuD). Várias abordagens de melhoramento genético e transgénicas foram tentadas para superar o problema. Entre elas, a interferência de RNA (RNAi) provou ser mais promissora. O uso da interferência de RNA é favorável, pois a técnica é amiga do ambiente. No trabalho de pesquisa atual, a construção genética baseada em RNAi foi transformada em duas variedades de algodão de elite, MNH-786 e VH-289, para aumentar a resistência viral contra a CLCuD. A transformação da construção nas plantas foi feita pelo método de ápice do rebento mediado por Agrobacterium. A transformação e integração bem-sucedidas da construção de RNAi baseada em amplicon foram confirmadas por PCR nas gerações T1 e T2, utilizando primers específicos para o gene. A capacidade de supressão da construção C2 foi confirmada por PCR em tempo real do título de CLCuD. A comparação do índice de doença viral e do título viral garantiu que as plantas que apresentavam integração positiva do gene RNAi com sintomas mínimos também tinham um título viral baixo.